Soluções para pesquisa proteômica
A LC/MS/MS é freqüentemente considerada a técnica de escolha para a identificação
de componentes de misturas complexas. Entretanto, pode apresentar algumas limitações.
Nesses casos, uma abordagem alternativa é o uso de LC/MALDI.
A LC/MALDI apresenta diversas vantagens, comparada a LC sem o acoplamento com o espectrômetro
de massa MALDI, como:
. Maior aquisição de dados no topo do pico cromatográfico para permitir a seleção
precisa de íons precursores para a análise MS/MS;
. A identificação de peptídeos isobáricos;
. Arquivamento de amostra (se necessário, a placa MALDI pode ser armazenada e utilizada
posteriormente para validar a identificação de proteínas);
. Maior cobertura de amostra e maior cobertura de seqüência para as proteínas detectadas.
. projetado para coleta on-line de frações de eluente proveniente de cromatografia
líquida nano/capilar (LC)
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O AccuSpot é totalmente integrado com os sistemas micro HPLC para separações 1D
e 2D.
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. Permite o micro-fracionamento automático em placas MALDI para posterior análise
por MALDI-TOF/MS, em placas de 96 ou 384 poços.
. Permite a amostragem contínua de múltiplas placas. A característica de cambiador
de placas permite a amostragem em até nove placas sem paradas.
. Pode adicionar soluções de matriz automaticamente: a amostragem é realizada nas
placas enquanto as soluções de matriz são automaticamente adicionadas ao eluente do
HPLC.
. É possível monitorar a amostragem: o sistema inclui uma câmera CCD como acessório
padrão, de forma que o status de amostragem possa ser observado na tela do computador*
* com placa de captura de vídeo opcional
. Pode adicionar soluções de matriz automaticamente: a amostragem é realizada nas
placas enquanto as soluções de matriz são automaticamente adicionadas ao eluente do
HPLC.
O AccuSpot automatiza o micro-fracionamento LC, amostragem e preparação para análise
MS. Com o sistema AccuSpot,o eluente do HPLC pode ser amostrado continuamente e de
forma precisa sobre placas MALDI em quantidade nível traço (e.g. 50 nL). Isto permite
a preparação para medições MALDI-TOF-MS.
Utilizando em conjunto com o sistema Micro HPLC 2D da Shimadzu e o AXIMA-MALDI-TOF,
a análise proteômica pode ser realizada com um alto nível de precisão e ampla cobertura
de seqüência.
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Passo 1 - Formação da gotícula. A posição do capilar é estática enquanto que
a placa de MALDI está na posição "standby".
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Passo 2 - Deposição da gotícula. A placa MALDI é precisamente movida para a
gotícula.
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Passo 3 - Restabelecimento. A placa MALDI retorna à posição "standby".
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Alta capacidade de amostra:
9 placas MS podem ser carregadas ao mesmo tempo (formato 96 ou 384 poços) [Para permitir
rastreamento de amostra, pode-se utilizar um leitor de código de barra opcional]
Amostragem altamente flexível:
A taxa de fluxo da solução de matriz ode ser aplicada desde 0.1 uL/min até 50 uL/min.
A direção de amostragem pode ser reta ou em zigzag. Uma câmera CCD é utilizada para
monitorar o micro-fracionamento para garantir que a coleta e formação da gotícula
são consistentes.
Modo de amostragem exclusivo:
A amostragem usa o 'método de semi-contato' utilizando sensores de placa (em processo
de patente)
Modo preparatório:
Modo contínuo (amostragem por período fixo de tempo)
Modo tempo-específico (amostragem contínua por um período de tempo determinado: 5
a 60 seg/gotícula.
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